Una nave espacial que viaja a un planeta colonia distante y transporta a miles de personas tiene un mal funcionamiento en sus cámaras de sueño. Como resultado, dos pasajeros son despertados 90 años antes.
Peter Quill, aún conmocionado por la pérdida de Gamora, debe reunir a su equipo en torno a él para defender el universo junto con la protección de uno de los suyos. Una misión que, si no se lleva a cabo con éxito, podría suponer el fin de los Guardianes tal y como los conocemos.
Peter Quill, debe mantener una incomoda alianza con Gamora, Drax, Rocket y Groot para asegurar un artefacto que pone en peligro a toda la galaxia no caiga en las manos del temible Ronan el Acusador.
De la mano de un robot, un contrabandista y su ocurrente compañero, una adolescente huérfana emprende un inolvidable viaje en busca de su hermano menor desaparecido.